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Daher brauchen sie in Kita und Krippe ein besonderes Maß an Aufmerksamkeit… 식물 키티나아제의 구조와 역할의 다양성은 식물의 진화 과정에서 발전해 왔으며, 진화계의 다른 식물들은 구조와 역할이 다른 키티나아제(chitinases)를 가질 것으로 예상된다. 연구원은 주로 종자 식물의 키티나제에 초점을 맞추고있다. 우리는 양치류에서 파생 된 치티나제에 관심이 있습니다. 고사리는 씨없는 혈관 식물이며 진화 혈통의 종자 식물과 분명히 다릅니다 (Pryer et al. 2001). 우리는 양치류의 키티나제에 대한 구조적 및 생리적 연구가 아마도 식물 왕국의 키티나아제의 근본적인 측면을 더 잘 이해하게 될 것이라고 생각합니다. 그러나 현재까지 양치류의 치티나스에 대한 보고는 없었습니다. 타RFP-MpTUB2pR-D/TOPO(R.N., 미공개)로 복제된 것은 게이트웨이 바이너리 벡터 pMpGWB202(Ishizaki et al., 2015)와 함께 LR 반응에 사용되어 CaMV35Spro:TagRFP-MpTUB2 구문을 생성하였다. 이 구문은 MpNEK1-Citrine(라인 #2)과 보완된 MpNEK1 녹아웃의 탈리를 재생하여 MpNEK1-Citrine 및 TagRFP-MpTUB2를 모두 표현하는 이중 라벨 라인을 생성하기 위해 도입되었습니다.

형질전환제는 100 μg/ml 젠타마이신(와코 순수 화학 공업) 및 100 μg/ml 세포조시즘으로 선택되었습니다. 덕신 D와 마호니 WC : 튜니카마이신의 자연 상동체의 구조와 생물학적 활성의 관계. J Biol Chem. 257:3105-3109. 1982.PubMed/NCBI 모든 siRNAs는 시그마-알드리치 일본에서 구입하였다: 음극 대조군 (Mission_SIC-001), Adk (SASI_Mm01_00192948), Ak2 (SASI_Mm01_00189879), Mk3 (SASI_Mm01_00081897) 및 Mkk6 (SASI_Mm01_00127382). 항생제 없이 배양 배지의 500 μl에서 총 8×103 T9 세포를 24웰 플레이트각각에 첨가하고 12-16시간 동안 배양하였다. siRNA 용액은 Opti-MEM에서 두 개의 상이한 siRNAs를 동시에 사용할 때 각 siRNA의 300 nM 또는 150 nM의 농도로 제조되었으며® 1% 리포펙타민® RNAiMAX 시약(Thermo Fisher Scientific)을 함유한 혈청 배지(Thermo Fisher Scientific)를 감소시켰으며실온에서 10분 동안 배양하였다.

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